公司產(chǎn)品僅供科研研究使用、不得用于臨床診斷！

一、商品介紹：

二、細(xì)胞培養(yǎng)操作

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

    a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min（視細(xì)胞情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。        

     c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。

     b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。  

三、培養(yǎng)注意事項(xiàng) 

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象 發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需 細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由 客戶(hù)自行承擔(dān)。

3. 用 75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度 變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正?，F(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶置于 37℃培養(yǎng)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清。加 5 mL PBS 重懸細(xì)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培養(yǎng)基重懸 細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請(qǐng)客戶(hù)用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶(hù)收到細(xì)胞后前 3 天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通 交流。由于運(yùn)輸?shù)脑?，個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞 的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基 (灌液培養(yǎng)基) 不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培 養(yǎng)條件新配制的培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。     收到細(xì)胞后第一次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 注意：  1:2 傳代就是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè) T25 瓶或者 2 個(gè) 6cm 皿。不是 1 個(gè) T25 瓶傳 2 個(gè)10cm 皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

ANGPTL4 Others Human 人 ANGPTL4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 大鼠抑制素βE(INHβE)ELISA試劑盒 LH 促黃體生成素 96T

MAGEA11： 黑色素瘤相關(guān)抗原11抗體 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3

AE-1雜交瘤細(xì)胞抗AChE AE-1 hybridoma cells against AChE DMEM+10% Hyclone 滅活血清 大鼠抑制素βC(INHβC)ELISA試劑盒 FSH 促卵泡生成素 96T

MAS1L： G蛋白偶聯(lián)受體MAS相關(guān)蛋白抗體 RK3 Others Mouse 小鼠 RK3 / kC 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠抑制素βA(INHβA)ELISA試劑盒 PLH 催乳素 96T

Nuclear Matrix Protein p84： 核基質(zhì)p84蛋白抗體 CL-0422RBL-1(大鼠嗜堿性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SK-N-SH細(xì)胞，人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞 環(huán)狀芽孢桿菌 人前列腺上皮細(xì)胞RNAHPEpiC miRNA5 μg 人抗肺泡基底膜抗體(ABM-Ab)ELISA 試劑盒 NT-3 神經(jīng)生長(zhǎng)因子-3(抗原) 0.5mg

Centromeric histone H3-like protein-2： 組蛋白H3樣抗體 HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

人鼻咽癌細(xì)胞;CNE-2Z 人抗紡錘體抗體(MSA)ELISA 試劑盒 NT-4,NT-5 神經(jīng)生長(zhǎng)因子4/5(抗原) 0.5mg

Centromeric histone H3-like protein-1： 組蛋白H3樣抗體 人永生化淋巴細(xì)胞;CNLMG-B5538LC

calu-6人退行性癌細(xì)胞phospho-PI 3 Kinase p110 delta (Tyr524)： 0酸化0脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體 CL-0112HMy2.CIR(人B淋巴母細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

SW-13人腎上腺皮質(zhì)小細(xì)胞癌細(xì)胞 SW-13 cells of small cell carcinoma of adrenal cortex L-15培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS 大鼠活性氧調(diào)制因子1(ROMO1)ELISA試劑盒 TpP(Mouse thrombus precursor protein)  小鼠血栓前體蛋白 96T

phospho-RAD9(Ser277)： 0酸化細(xì)胞周期檢查控制蛋白質(zhì)抗體 SPI2 Others Mouse 小鼠 SPI2 / HAI2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S4 大鼠活性氧簇(ROS)ELISA 試劑盒 DHT  大鼠雙氫睪酮 96T

Perforin： 穿孔素抗體 兔腎細(xì)胞;RK-13